多肽合成概述及原理（及相關合成儀器）

        多肽是參與生物體各種細胞功能的生物活性物質。它是一種分子結構介于氨基酸和蛋白質之間的化合物。它是由多種氨基酸按一定順序通過肽鍵組合而成。迄今為止，人們已發現并分離出存在于人體內的一百多種肽。多肽的研究和利用呈現出qian所未有的繁榮。
        多肽的合成不僅具有非常重要的理論意義，而且具有重要的應用價值。通過肽合成，可以驗證新的肽結構；新肽旨在研究結構和功能之間的關系；為肽生物合成反應機制提供重要信息；建立模型酶，合成新的多肽藥物。
         1963年，RBMerrifield建立了一種固相合成方法，將多肽羧基末端的氨基酸固定在不溶性樹脂上，然后將氨基酸依次偶聯到樹脂上，延長肽鏈，合成多肽。在固相法中，每一步反應后只需簡單清洗樹脂即可達到提純的目的。它克服了經典液相合成方法每一步都難以純化產物的難題，為多肽的自動化合成奠定了基礎。為此，梅里菲爾德獲得了 1984 年的諾貝爾化學獎。
         Merrifield建立的Boc合成方法使用TFA（三氟yi酸）去除Boc（叔丁氧羰基）作為α-氨基保護基團，側鏈保護使用苯甲醇。在合成過程中，Boc-氨基酸衍生物與樹脂共價交聯，Boc用TFA去除，游離氨基末端用三乙胺中和，然后下一個氨基酸被DCC活化并偶聯。最終脫保護多采用HF法或TFMSA（三氟甲磺酸）法。 Boc法已成功合成了許多生物大分子，如活性酶、生長因子、人工蛋白質等。
        在 Boc 合成方法中，反復使用酸進行脫保護。這種處理帶來了一些問題：例如，在肽和樹脂的連接處，每次用50%的TFA去除Boc基團時，大約有1.4%的肽從樹脂上脫落。合成的肽鏈越長，損失越嚴重。另外，酸處理會引起側鏈的一些副反應。 Boc合成法特別不適合合成色氨酸等不穩定的酸。肽。 1978 年，Chang、Meienlofer 和 Atherton 等人。使用 Carpino 報道的 Fmoc（9-芴基甲氧羰基）基團作為 α-氨基保護基團形成Fmoc固相合成多肽成功。 Fmoc法與Boc法的根本區別在于使用堿可除去的Fmoc作為α-氨基的保護基，側鏈保護使用TFA-可除去的叔丁氧基。該樹脂使用 90% TFA 可去除對。烷氧基芐醇類樹脂，最終脫保護避免強酸處理。
        自Merrifield成功開發固相肽合成法以來，經過不斷改進和完善，固相法已成為當今肽和蛋白質合成中的常用技術，顯示出液相合成法wu法比擬的優勢。近幾十年來，多肽的固相合成以其省時、省力、省料、易計算機控制、易于推廣等突出優點成為多肽合成的常規方法。各種基于Boc和Fmoc方法的自動肽合成儀也相繼出現，并且還在不斷的開發和改進中。
        固相合成的基本原理
        肽合成是一個重復添加氨基酸的過程。固相合成的順序一般是從C端（羧基端）到N端（氨基端）合成。過去，肽的合成是在溶液中進行的，稱為液相合成?，F在多采用固相合成，大大降低了每一步產品純化的難度。為防止副反應的發生，對參與反應的氨基酸側鏈進行保護；羧基末端是游離的，必須在反應前活化。有兩種化學合成方法，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc有很多優點，所以大部分都是用Fmoc方法合成的。
        每個循環由以下三步反應組成，循環重復，直到肽鏈達到所需長度。
         1、脫保護：Fmoc保護的氨基酸必須用堿性溶劑（哌啶）脫去氨基的保護基。
         2、活化：被連接的氨基酸的羧基被活化劑活化。
         3.偶聯：活化的羧基與前一個氨基酸暴露的氨基反應形成肽鍵。在該步驟中使用過量的試劑來推動反應完成。
            PSI多肽合成儀特點：
         ü 采用316L不銹鋼制造，zui大程度防止肽合成試劑的腐蝕。
         ü *的設計可以大大節省客戶的運營成本。
         ü 不同規格的電抗器可自由更換，最多可使用一臺儀器。
         ü 氣液輸送系統均采用電磁閥組合設計，*實現自動控制。
         ü 采用全自動試劑循環系統（PSI200除外），可為客戶直接節省50%的試劑。
         ü 采用上下180度攪拌方式，反應**，偶聯率高。
         ü 可實現在線裂解，反應**，裂解效果優于有死角的攪拌法。
         ü 全系列*實現線性放大。
         ü 自動清洗送液管路功能。
         1、PSI合成規模參考標準
        PSI合成規模以ABI433A肽合成儀技術標準為參考標準
        1）反應器體積：8ml，最佳合成規模：0.10mmol
         2）反應器體積：41ml，最佳合成規模：0.25/0.50mmol
         3）反應器體積：55ml，最大（經驗）合成規模：1.0mmol
         2、PSI理論合成收率計算標準
        1）大多數多肽的分子量在500~5000（mg/mmol）之間；
         2）合成收率zui低的分子量為1000，收率最高的分子量為4000；
         3）合成規模為0.01～0.1mmol，則合成收率為10 (0.01X1000) 至 400 (0.1X4000) 毫克；
         3、PSI對合成規模的理解
        1）液體輸送管道的粗細和電磁閥的尺寸是決定合成器合成規模的基本因素；
         2）同類型儀器與合成規模相差6-8倍，更經濟合理。
         4、PSI標準規格合成器的合成音階